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<institution><![CDATA[,Universidade de Évora Instituto de Ciências Agrárias Mediterrânicas (ICAM) ]]></institution>
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<abstract abstract-type="short" xml:lang="en"><p><![CDATA[Breeding programs and activities of conservation of genetic resources of forest species are years behind the equivalents in agriculture. Forest resources have been traditionally considered as “mining supplies”, in which extraction was the main object, leaving exclusively to natural regeneration the “labour” of maintenance of the stands. Nowadays, the necessary development of rural lands forces to a rational exploitation of resources to guarantee its sustainability. Because of that, the opinion that forest species can and must be “harvested” in specific areas is beginning to be spread. Biological characteristics of forest species make them, sometimes, recalcitrant to the breeding and conservation techniques usually applied to agricultural species. Particularly, vegetative propagation has been highly used in woody harvests as an effective tool for achieving higher genetic gains, making use of the best genetic combinations. In forest species, especially the Mediterranean ones, this method of improvement has been hardly applied, due to the low morphogenetic ability and the great influence of maturation or phase change on this trait. Over the last few years, forest biotechnology has had a great development. Particularly, plant regeneration techniques based on in vitro tissue culture, mainly via somatic embryogenesis, are being used by different private firms and public institutions for the conservation of selected trees and for the establishment of clonal trials with different species. Our research teams are developing protocols for the regeneration of different forest species via somatic embryogenesis. This work presents the actual state of knowledge in two typical Mediterranean species: cork oak (Quercus suber L.) and stone pine (Pinus pinea L.) highlighting the main bottle-necks for their application on a large scale.]]></p></abstract>
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</front><body><![CDATA[ <p align="center"><b>La embriogénesis somática como vía de regeneración clonal    de especies forestales mediterráneas </b></p>     <p align="center"><b>Somatic embryogenesis as a regeneration method for clonal    propagation of Mediterranean forest species </b></p>     <p>&nbsp;</p>     <P align="center">C. Celestino<Sup><a href="#1">1</a><a name="top1"></a></Sup>,    I. Hernández<Sup><a href="#1">1</a><a name="top1"></a></Sup>, E. Carneros<Sup><a href="#1">1</a><a name="top1"></a></Sup>,    D. López-Vela<Sup><a href="#1">1</a><a name="top1"></a></Sup>, J. Jiménez<Sup><a href="#1">1</a><a name="top1"></a></Sup>,    J. Alegre<Sup><a href="#1">1</a><a name="top1"></a></Sup>, A. Vieira-Peixe<Sup><a href="#2">2</a><a name="top2"></a></Sup>,    A. Zavattieri<Sup><a href="#2">2</a><a name="top2"></a></Sup> &amp; M. Toribio<Sup><a href="#1">1</a><a name="top1"></a>    </Sup></P>     <p>&nbsp;</p>     <p align="center"><b>RESUMO </b></p>     <p>La mejora y conservación de recursos genéticos en especies forestales lleva    siglos de retraso con respecto a las especies agrícolas. Los recursos forestales    se han considerado tradicionalmente como recursos “mineros”, en los que primaba    la mera extracción dejando exclusivamente a la regeneración natural la labor    de sostenibilidad en los montes y dehesas o montados. Hoy en día, el necesario    desarrollo del medio rural obliga a la explotación racional de los recursos    como medio de garantizar su sostenibilidad. Por ello se está empezando a extender    el criterio de que las especies forestales se pueden y deben “cultivar” en determinados    espacios. </P>     <p>Las características biológicas de las especies forestales las hacen, a menudo,    recalcitrantes a las técnicas de mejora y conservación de recursos genéticos    tradicionalmente aplicadas a especies agrícolas. En particular, la propagación    vegetativa se ha utilizado ampliamente en muchos cultivos leñosos como una herramienta    muy poderosa para capturar todo el potencial genético de combinaciones genéticas    valiosas. En especies forestales, en particular en las mediterráneas, esta posibilidad    raramente se ha podido aplicar debido a la baja capacidad morfogénica de estas    especies y la fuerte influencia de la maduración o cambio de fase. </P>     <p>En los últimos años la biotecnología forestal ha tenido un desarrollo espectacular.    En particular las técnicas de regeneración clonal de plantas basadas en técnicas    de cultivo <i>in vitro</i>, fundamentalmente vía embriogénesis somática, se    están ya aplicando por muchas empresas privadas e instituciones públicas a nivel    semi-operativo con diversas especies, para la conservación de material selecto    y el establecimiento de ensayos clonales. </P>     <p>Nuestros grupos de trabajo están desarrollando protocolos de regeneración por    embriogénesis somática en distintas especies forestales. En esta comunicación    se presenta el estado actual de los conocimientos en dos especies típicamente    mediterráneas, el alcornoque (<i>Quercus suber</i> L.) y el pino piñonero (<i>Pinus    pinea</i> L.), destacando los principales cuellos de botella para su aplicación    a gran escala. </P>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>&nbsp;</p>     <p align="center"><b>ABSTRACT </b></p>     <p>Breeding programs and activities of conservation of genetic resources of forest    species are years behind the equivalents in agriculture. Forest resources have    been traditionally considered as “mining supplies”, in which extraction was    the main object, leaving exclusively to natural regeneration the “labour” of    maintenance of the stands. Nowadays, the necessary development of rural lands    forces to a rational exploitation of resources to guarantee its sustainability.    Because of that, the opinion that forest species can and must be “harvested”    in specific areas is beginning to be spread. </P>     <p>Biological characteristics of forest species make them, sometimes, recalcitrant    to the breeding and conservation techniques usually applied to agricultural    species. Particularly, vegetative propagation has been highly used in woody    harvests as an effective tool for achieving higher genetic gains, making use    of the best genetic combinations. In forest species, especially the Mediterranean    ones, this method of improvement has been hardly applied, due to the low morphogenetic    ability and the great influence of maturation or phase change on this trait.    Over the last few years, forest biotechnology has had a great development. Particularly,    plant regeneration techniques based on <i>in vitro</i> tissue culture, mainly    via somatic embryogenesis, are being used by different private firms and public    institutions for the conservation of selected trees and for the establishment    of clonal trials with different species. </P>     <p>Our research teams are developing protocols for the regeneration of different    forest species via somatic embryogenesis. This work presents the actual state    of knowledge in two typical Mediterranean species: cork oak (<i>Quercus suber</i>    L.) and stone pine (<i>Pinus pinea</i> L.) highlighting the main bottle-necks    for their application on a large scale. </P>     <p>&nbsp;</p>     <p>Texto completo disponível apenas em PDF.</p>     <p>Full text only available in PDF format.</p>     <p>&nbsp;</p>     <p align="center"><b>REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS </b></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<!-- ref --><p>Álvarez, R., Alonso, P., Cortizo, M., Celestino, C., Hernández, I., Toribio,    M. &amp; Ordás, R.J. 2004. Genetic transformation of selected mature cork oak    (<i>Quercus suber</i> L.) trees. <i>Plant Cell Rep</i>, <b>23</b>: 218-223.  &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000023&pid=S0871-018X200700010005100001&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><p>Ayuso, J. &amp; Méndez, P. 1999. Balance cualitativo y cuantitativo del programa    de forestación de tierras agrarias en España. Reglamento (CEE) 2080/92 sobre    medidas forestales en la agricultura. <i>Congreso sobre Forestación en las Dehesas.</i>    Junta de Extremadura, Mérida, España. </P>     <p>Campbell, M.M., Brunner, A.M., Jones, H.M. &amp; Strauss, S.H. 2003. Forestry’s    fertile crescent: the application of Biotechnology to forest trees. <i>Plant    Biotechnology Journal</i>, <b>1</b>: 141-154. </P>     <p>Carneros, E., Zavattieri, A., Hernández, I., Toribio, M. &amp; Celestino, C.    2005. Inducción de masas preembriogénicas en embriones cigóticos de pino piñonero.    <i>Congreso Forestal Nacional, Sociedad Española de Ciencias Forestales (SECF)</i>,    pp. 202. Zaragoza, España. </P>     <p>Celestino, C., Hernández, I., Carneros, E., López-Vela, D. &amp; Toribio, M.    2005a. La embriogénesis somática como elemento central de la biotecnología forestal.    <i>In</i> I. Aranda, M.T. Cervera, M. Pardos (eds) <i>Ecophysiology: from genes    to ecosystems. Investigación Agraria. Sistemas y Recursos Forestales. Fuera    de serie</i>, pp. 345-357. INIA, Madrid, España. </P>     <p>Celestino, C., Hernández, I., López-Vela, D., Carneros, E., Alegre, J., Fernández-Guijarro,    B., Cardo, L. &amp; Toribio, M. 2005b. First data from a field trial of <i>Quercus    suber</i> plants regenerated from mature selected trees and from their half-sib    progenies by somatic embryogenesis. <i>Acta Horticulturae</i> (en prensa). </P>     <p>El-Kassaby, Y. 2004. Feasibility and proponed outline of a global review of    forest biotechnology. Forest Genetic Resources Working Paper FGR/77E: Forest    Resources Development Service, Forest Resources Division. Fao, Rome. </P>     <p>FAO. 2004. Report of the 13th Session of the FAO Panel of Experts on Forest    Genetic Resources. Rome, Italy. 10-12 November 2003. FO:FGR/13/Rep. </P>     <p>Fernández-Guijarro, B., Celestino, C. &amp; Toribio, M. 1991. Somatic embryogenesis    in <i>Quercus suber</i> L. I.U.F.R.O. <i>Working Party on Genetics of Quercus    species.</i> Arboretum National des Barres, France. </P>     <p>Fernández-Guijarro, B., Celestino, C. &amp; Toribio, M. 1994. Somatic embryogenesis    in <i>Quercus suber</i> L. <i>In</i> J.A. Pardos, M.R Ahuja, R. Elena-Rossello    (eds) <i>Biotecnology of Trees. Investigación Agraria. Sistemas y Recursos Forestales.    Fuera de Serie nº 4</i>, pp. 105-110. INIA, Madrid, España. </P>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>Fernández-Guijarro, B., Celestino, C. &amp; Toribio, M. 1995. Influence of    external factors on secondary embryogenesis and germination in somatic embryos    from leaves of <i>Quercus suber. Plant Cell, Tissue Org Cult</i>, <b>41</b>:    99-106. </P>     <p>Gallego, F.J., Martínez, I., Celestino, C. &amp; Toribio, M. 1997. Testing    somaclonal variation using RAPDs in <i>Quercus suber</i> L. somatic embryos.    <i>Int J. Plant Sci.</i>, <b>158</b>: 563-567. </P>     <p>Hernández, I., Celestino, C., Alegre, J. &amp; Toribio, M. 2003. Vegetative    propagation of <i>Quercus suber</i> L. by somatic embryogenesis: II. Plant regeneration    from selected cork oak trees. <i>Plant Cell Rep.</i>, <b>21</b>: 765-770. </P>     <p>Hernández, I., Celestino, C., Martínez, I., Manjón, J.L., Díez, J., Fernández-Guijarro,    B. &amp; Toribio, M. 2001. Cloning mature cork oak (<i>Quercus suber</i> L.)    trees by somatic embryogenesis. <i>Melhoramento</i>, <b>37</b>: 50-57. </P>     <p>INIA. 2005. <a href="http://www.inia.es/inia/" target="_blank">http://www.inia.es/gcont/redestem/centrosydep.jsp?</a>    idcentro=69&amp;tema =relint </P>     <p>Jiménez J., Hernández, I., López-Vela, D., Toribio, M. &amp; Alegre, J. 2005.    Desarrollo de embriones somáticos de alcornoque en biorreactores de inmersión    temporal. <i>VI Reunión de la Sociedad Española de Cultivo In Vitro de Tejidos    vegetales</i>, pp. 38 Córdoba, España. </P>     <p>Lopes, F.J. &amp; Pinto-Ribeiro, J.R.D. 1999. Arborização de terras agricolas    em Portugal. Análise quantitativa e qualitativa (considerações breves). <i>Congreso    sobre Forestación en las Dehesas</i>. Junta de Extremadura, Mérida, España.  </P>     <p>MEC. 2005 <a href="http://foto.difo.uah.es/forestgenomics_es/index_esp.html" target="_blank">http://foto.difo.uah.es/forestgenomics_es/index_esp.html.</a>    Ministerio de Educación y Ciencia, España. </P>     <p>Mejías, F. 1999. Balance del programa de forestación de tierras agrarias en    Extremadura. <i>Congreso sobre Forestación en las Dehesas.</i> Junta de Extremadura,    Mérida, España. </P>     <p>Pâques, M. 1999. Industrial applications of forest biotechnology. <i>In</i>    S. Espinel &amp; E. Ritter (eds) <i>Proceedings of Application of Biotechnology    to Forest Genetics Biofor’ 99</i>, pp. 525-526. Vitoria-Gasteiz, España. </P>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>Puigderrajols, P., Fernández-Guijarro, B., Toribio, M. &amp; Molinas, M. 1996.    Origin and early development of secondary embryos in <i>Quercus suber</i> L.    <i>Int J Plant Sci</i>, <b>157</b>: 674-684. </P>     <p>Sutton, B. 2002. Commercial delivery of genetic improvement to conifer plantations    using somatic embryogenesis. <i>Annals of Forest Science</i>, <b>59</b>: 657-661.  </P>     <p>Toribio, M. &amp; Celestino, C. 1989. Cultivo <i>in vitro</i> del alcornoque.    <i>Scientia Gerundensis</i>, <b>15</b>: 11-21. </P>     <p>Toribio, M. &amp; Celestino, C. 2000. El uso de la biotecnología en la conservación    de recursos genéticos forestales. <i>In</i> L.A. Gil &amp; R. Alía (eds) <i>Conservación    de Recursos Genéticos Forestales. Investigación Agraria. Sistemas y Recursos    Forestales. Fuera de Serie, nº 2</i>, pp. 249-260. INIA, Madrid, España. </P>     <p>Toribio, M., Celestino, C., Gallego, J. &amp; Martínez, I. 2000. Induction    of somatic embryogenesis in tissues from mature oak trees. <i>In</i> F.Ó. Ríordáin    (eds) <i>Development of Integrated Systems for Large-scale Propagation of Elite    Plants Using in Vitro Techniques. EUR 19237, ISBN 92-828-8599-2</i>, pp. 236-237.    Office for Official Publications of the European Communities, Luxembourg. </P>     <p>Valladares, S., Toribio, M., Celestino, C. &amp; Vieitez, A.M. 2004. Cryopreservation    of embryogenic cultures from mature <i>Quercus suber</i> trees using vitrification.    <i>CryoLetters</i>, <b>25</b>: 177-186. </P>     <p>&nbsp;</p>     <p><Sup><a href="#top1">1</a><a name="1"></a></Sup>Instituto Madrileño de Investigación    y Desarrollo Rural, Agrario y Alimentario (IMIDRA). Finca El Encín, Apdo. Postal    127, 28800 Alcalá de Henares, Madrid, España; e-mail: mariano.toribio@madrid.org;    <Sup><a href="#top2">2</a><a name="2"></a></Sup>Instituto de Ciências Agrárias    Mediterrânicas (ICAM).Universidade de Évora; e-mail: <a href="mailto:zavattieri@uevora.pt">zavattieri@uevora.pt</a>  </P>      ]]></body><back>
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